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生物安全柜详解(特点,分类,操作要求,注意事项等)

  • 更新日期:2022-02-20      浏览次数:2200
    •  一、介绍:生物安全柜顾名思义就是为操作原代培养物、菌毒株以及诊断性标本等具有感染性的实验材料时,用来保护操作者和实验室环境以及实验材料,使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性气溶胶和溅出物而设计的。
      二、生物安全等级:
      生物安全等级1级(P1)的媒质是指普通无害细菌、病毒等微生物;
      生物安全等级2级(P2)的媒质是指一般性可致病细菌、病毒等微生物;
      生物安全等级3级(P3)的媒质是指烈性/致命细菌、病毒等微生物,但感染后可治愈;
      生物安全等级4级(P4)的媒质是指烈性/致命细菌、病毒等微生物,感染后不可治愈。
      三、生物安全柜分类:一般是分为三个等级,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级,是根据结构,气流速度、气流类型,排气方式分的。执行标准是,世界上生物安全柜领域执行的标准欧洲标准EN12469和美国卫生基金会的第49号标准。
      四、生物安全柜的安装要求:
      远离风扇,热源,空调出风口,实验室抽风机, 实验室动线及门口避免安全柜受乱流干扰
      机台上方至少须有6 英吋的空间,左右二侧及背后至少须有12 英吋的空间
      所有的窗户都紧闭
      安装地点须为平整及固体式地板
      要有专用的电源插座
      五、不同级别的生物安全柜作用及特点:
      生物安全柜作用:
      Ⅰ级生物安全柜是指用于保护操作人员与环境安全、而不保护样品安全的通风安全柜。适用于对处理样品安全性无要求且生物危险度等级为1、2、3的媒质的操作。
      Ⅱ级生物安全柜是指用于保护操作人员、处理样品安全与环境安全的通风安全柜,柜内保持负压状态,适用于生物危险度等级为1、2、3的媒质的操作。按照美国NSF49标准,一般将Ⅱ级生物安全柜划分为A1、A2、B1、B2四个类型。
      Ⅲ级生物安全柜为临床生物防护中应用*普遍的一类生物安全柜。临床中处理高浓度或大容量感染性材料时,级生物安全柜应用*多。
      生物安全柜特点:
      Ⅰ级生物安全柜是一种装配有HEPA过滤器的防污染装置。
      对操作者及环境均不受颗粒及感染性生物材料污染。其
      工作空间前开口处有定向的向工作空间内流动的气流。
      在负压状态下工作。
      适合生物污染1,2,3级防护。
      空气的流动为单向、非循环式,空气流经HEPA过滤器后进入柜内,通过工作台面后又被过滤、经排气口排出;
      注意:为了保护操作人员安全和保护环境,其向内的非循环吸入气流远离操作者;安全柜中的气体在外排到大气以前先经过HEPA过滤器过滤。
      Ⅱ级生物安全柜从前开口吸入具有表面速度的气流,保护操作者,垂直的、无颗粒的层流气体保护工作区内的样品不会受到交叉感染。
      A1型特点:
      维持穿过工作台开口面的*小平均吸入口风速(计算或测量值)为0.38m/s(75ft/min);
      由静压箱送出的,经HEPA过滤器过滤的垂直气流是垂直气流和吸入气流混合后的一部分;
      允许经排出口HEPA过滤器过滤后的气流返回实验室;
      允许有正压的污染风道和静压箱。
      A2型特点
      维持穿过工作台开口面的*小平均吸入口风速为0.5m/s;
      经HEPA过滤器过滤后的垂直气流是由静压箱排出的垂直气流和吸入气流混合后的一部分;
      经HEPA过滤器过滤后,所有废气才能排到室外,但废气不可再进入安全柜循环或返回实验室;
      所有被生物污染的风道和静压箱应保持负压或者被负压的风道和静压箱包围。
      B1型特点:
      维持穿过工作台开口面的*小平均吸入口风速(计算或测量值)为0.5m/s(100ft/min);
      经HEPA过滤器过滤后的垂直气流中的绝大部分是由未污染的循环吸入气流组成;
      经HEPA过滤器过滤后的大部分污染的垂直气流,通过专用风道过滤后排入大气;
      所有被生物污染的风道和静压箱应保持负压,或被负压的风道和静压箱包围。
      B2型特点
      维持穿过工作台开口面的*小平均吸入口风速(计算或测量值)为0.5m/s(100ft/min);
      经HEPA过滤器过滤后的垂直气流是由实验室或室外空气送入的;
      所有的吸入气流和垂直气流经HEPA过滤器过滤后排入大气,不再进入安全柜循环或返回实验室;
      所有污染的风道和静压箱应保持负压,或是被直接排风的风道和静压箱包围。
       Ⅲ级生物安全柜适合于严禁与操作者相接触的样品的操作。
      全密封,气密型结构;至少在0.5" 水柱的负压下工作
      出风口需经过双HEPA过滤器
      适合于生物污染1、2、3、4级防护
      工作空间内为经HEPA过滤器净化的无涡流的单向流空气。
      进入气流经数个HEPA过滤器过滤后送入安全柜,排出气流应经双层HEPA过滤器过滤或通过HEPA过滤器过滤和焚烧来处理。
      六、生物安全柜操作规则:
      缓慢移动原则:为了避免影响正常的风路状态,柜内操作时手应该尽量平缓移动。
      物品平行摆放原则:为了避免物品和物品之间的交叉污染现象产生,在柜内摆放的物品应该尽量呈横向一字摆开,避免回风过程中造成交叉污染。同时避免堵塞背部回风隔栅影响正常风路。
      避免震动原则:柜内尽量避免震动仪器(例如离心机、旋涡振荡器等)的使用,因为震动会使得积留在滤膜上的颗粒物质抖落,导致操作室内部洁净度降低,同时如果在前操作面平衡失败还会引起安全柜对操作者的污染。
      不同样品柜内移动原则:柜内两种及以上物品需要移动时,遵循低污染性物品向高污染性物品移动原则,避免污染性高的物品在移动过程中产生对柜体内部的大面积污染。
      七、生物安全柜操作注意事项:
      操作前应将本次操作所需的全部物品移入安全柜,避免双臂频繁穿过气幕破坏气流;并且在移入前用75%酒精擦拭表面消毒,以去除污染。
      打开风机5~10分钟,待柜内空气净化并气流稳定后再进行实验操作。将双臂缓缓伸入安全柜内,至少静止1分钟,使柜内气流稳定后再进行操作。
      安全柜内不放与本次实验无关的物品。
      柜内物品摆放应做到清洁区、半污染区与污染区基本分开,操作过程中物品取用方便,且三区之间无交叉。
      物品应尽量靠后放置,但不得挡住气道口,以免干扰气流正常流动。
      操作时应按照从清洁区到污染区进行,以避免交叉污染。
      为防可能溅出的液滴,可在台面上铺一用消毒剂浸泡过的毛巾或纱布,但不能覆盖住安全柜格栅。
      柜内操作期间,严禁使用酒精灯等明火,以避免产生的热量产生气流,干扰柜内气流稳定;且明火可能损坏HEPA滤器。
      工作时尽量减少背后人员走动以及快速开关房门,以防止安全柜内气流不稳定。
      在实验操作时,不可打开玻璃视窗,应保证操作者脸部在工作窗口之上。在柜内操作时动作应轻柔、舒缓,防止影响柜内气流。
      安全柜应定期进行清洁消毒,柜内台面污染物可在工作完成且紫外灯消毒后用2%的84消毒液擦拭。柜体外表面则应每天用1%的84消毒液擦拭。
      柜内使用的物品应在消毒后再取出,以防止将病原微生物带出而污染环境。
      安全柜应定期进行检测与保养,以保证其正常工作。工作中一旦发现安全柜工作异常,应立即停止工作,采取相应处理措施,并通知相关人员。